Ⅰ 焦碳酸二乙酯的风险
刺激眼睛、呼吸系统和皮肤。
DEPC有刺激性,对眼睛和气道粘膜有强刺激,在操作中应尽量在通风的条件下进行,DEPC毒性并不是很强,但吸入的毒性最强。
DEPC是一种潜在的致癌物质,主要是能生成乙酯基衍生物和乙酯类衍生物,其中尿烷是一种已知的致癌物质。
Ⅱ RNA抑制剂有哪些及作用机理
1、焦碳酸二乙酯(DEPC):是一种强烈但不彻底的RNA酶抑制剂,他通过和RNA酶的活性基因团组氨酸的咪唑环结合使蛋白质变性,从而抑制酶的活性。
2、异硫氰酸胍:目前认为是最有效的RNA酶抑制剂,它在裂解组织的同时也使RNA酶失活,它既可破坏细胞结构使核酸从核蛋白中解离出来,又对RNA酶有强烈的变性作用。
3、氧钒核糖核苷复合物:由氧化钒离子和核苷形成的复合物,它和RNA酶结合形式过渡类物质,几乎能完全抑制RNA酶的活性。
4、RNA酶的蛋白质抑制剂(RNasin):从大鼠肝或人胚盘中提取得来的酸性糖蛋白.Rnasin是RNA酶的一种非竞争性抑制剂,可以和多种RNA酶结合,使其失活。
5、其他:SDS、尿素、硅藻土等对RNA酶也有一定的抑制作用。
RNA是以DNA的一条链为模板,以碱基互补配对原则,转录而形成的一条单链,主要功能是实现遗传信息在蛋白质上的表达,是遗传信息传递过程中的桥梁。tRNA的功能是携带符合要求的氨基酸,以mRNA为模板,合成蛋白质。
RNA由核糖核苷酸经磷酯键缩合而成长链状分子。一个核糖核苷酸分子由磷酸,核糖和碱基构成。RNA的碱基主要有4种,即A腺嘌呤,G鸟嘌呤,C胞嘧啶,U尿嘧啶。其中,U尿嘧啶取代了DNA中的T胸腺嘧啶而成为RNA的特征碱基。
Ⅲ 焦碳酸二乙酯的介绍
DEPC(Diethy pyrocarbonate),中文名为焦碳酸二乙酯。分子式为C6H10O5,分子量为162.14。是一种强烈但不彻底的RNA酶抑制剂。通过和RNA酶的活性基团组氨酸的咪唑环结合使蛋白质变性,从而抑制酶的活性,常用于生物实验中RNA的提取等。
Ⅳ 焦碳酸二乙酯(DEPC)是一种强烈但不彻底的RNA酶抑制剂,请问“强烈但不彻底”如何理解。
强烈就是指裂解速度比较快,不彻底就是不能全部抑制rna酶。
Ⅳ 焦碳酸二乙酯的基本信息
外文名称:DEPC
中文名称:焦碳酸二乙酯
中文别名:氧二甲酸二乙酯;重碳酸二乙酯;二碳酸二乙酯
英文别名:Diethyl oxydiformate; Ethoxyformic anhydride; Pyrocarbonic acid diethyl ester; Diethyl dicarbonate; DEP
CAS:1609-47-8
分子式:C6H10O5
分子量:162.1
储藏温度:2~8°C
DEPC是RNA酶的化学修饰剂,它和RNA酶的活性基团组氨酸的咪唑环反应而抑制酶活性。DEPC与氨水溶液混合会产生致癌物,因而使用时需小心。DEPC能与胺和巯基反应,因而含Tris和DTT的试剂不能用DEPC处理。
Ⅵ 焦碳酸二乙酯的用途
DEPC是一种有效的核酸酶抑制剂,它能够与很多酶的-NH,-SH或-OH等基团发生反应,从而破坏酶的活性中心。DEPC溶液浓度约为0.1% (v/v)时可使RNase失活,从而防止RNA被降解。在进行RNA实验时,常用DEPC处理实验所用的各种试剂。
我们通常所说的DEPC(处理)水是指用DEPC处理过并经高温高压消毒的MiliQ纯水。MiliQ纯水加0.1% DEPC,混匀过夜,121℃,20min。而后DEPC即降解成二氧化碳和酒精,失去毒性。
DEPC(处理)水可以用于RNA沉淀的溶解,含有RNA的各种反应体系如反转录、siRNA的退火等,以及其它各种要求无RNase、DNase和proteinase的反应体系。
Ⅶ 焦碳酸二乙酯的物化性质
密度:1.12 g/mL at 20°C沸点:93-94°C(18 mmHg)折射率:1.396-1.4闪点 :69°C水溶性: SLOW DECOMPOSITION蒸汽压:2.88E-10mmHg at 25°C
Ⅷ 什么是DEPC
DEPC即diethypyrocarbonate,中文名为焦碳酸二乙酯。分子式为C6H10O5,分子量为162.14。是一种强烈但不彻底的RNA酶抑制剂。通过和RNA酶的活性基团组氨酸的咪唑环结合使蛋白质变性,从而抑制酶的活性。
Ⅸ RNA提取实验过程实验中所用到“焦碳酸二乙酯(DEPC)”的作用是什么
减少外源性RNA酶污染的措施。实验教学过程中,由于人员多,耗材使用量大,再加上DEPC具有致癌性[8I,使用 DEPC水成本高且安全系数低,难以保证高质量RNA的提取。目前据说有更好的方法。